Yarışmalı ELISA Yontemi ile Romatoid Artrit İcin Diagnostik Kit Geliştirilmesi
Hazırlayan: Özlem Yalçınkaya, Arzu Ersöz, Rıdvan Say
Anadolu Üniversitesi Fen Fakültesi Kimya Bölümü, Eskişehir
Proje Özeti:
İmmunassay ölçüm sistemleri; doku, kan, serum, farklı vücut sıvıları, solüsyonlar
ve değişik katı, yarı katı ve sıvı maddeler içinde farklı maddelerin düzeylerinin
belirlenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Yarışmalı ELISA yöntemi ise çözünür
antijenleri tespit etmek ya da miktarlarını belirlemek için kullanılır. Saflaştırılmış ya
da yarı saflaştırılmış antijenlere özgü antikorlar ve miligram miktarlarda mevcutsa
çok kullanışlıdır. Çözünür antijenleri tespit etmek için, plakalar antijenle kaplanır ve
spesifik antikor-enzim konjugatlarının antijen kaplı plakalara bağlanması çözünür
antijen içeren test solüsyonları ile inhibe edilir. Test solüsyonundaki antijen miktarı
hidroliz substratının inhibisyonu ile orantılıdır ve standart antijen solüsyonunun bir seri
dilüsyonu ile elde edilen inhibisyon eğrisi ile miktarı belirlenir. Test sonucu elde edilen
renklenme klasik ELISA testinin tersine ortamda madde ne kadar azsa o kadar çok
gözlenir.
Romatoid Artrit (RA), eklemlerde kronik iltihaplara yol açan otoimmun bir hastalıktır. RA,
vücuttaki diğer organların yanında eklemlerin etrafındaki dokunun da iltihaplanmasına
sebep olabilir. RA hastalığında ortaya çıkan otoantikorlar hastalığın tanımlanmasında
oldukça önemlidir. Bu antikorlardan biri de anti siklik sitrulinlenmiş peptit (anti CCP)’dir.
Bu çalışmada pleyt, plazma polimerizasyon ile sitrulin molekülleriyle kaplanacaktır
ve hastada bulunan anti-CCP otoantikorların varlığının tespit edilmesine yönelik bir
yöntem geliştirilecektir